Đĩa ELISA dùng để làm gì? Các cách sử dụng đĩa ELISA hiệu quả

Đĩa ELISA là dụng cụ quan trọng dùng cho các xét nghiệm sinh hóa trong phòng thí nghiệm. Chúng được dùng khá phổ biến để phục vụ cho công tác học tập, giảng dạy và nghiên cứu. Vậy đĩa ELISA có đặc điểm gì và có những phương pháp nào để sử dụng đĩa ELISA 96 giếng. Cùng LabVIETCHEM tìm hiểu qua bài viết dưới đây.

1. Đĩa ELISA được dùng để làm gì?

- ELISA hay EIA là một kỹ thuật xét nghiệm sinh hóa để phát hiện các kháng nguyên hoặc kháng thể trong mẫu bệnh phẩm.

- Đĩa ELISA được dùng cho các xét nghiệm miễn dịch liên kết với enzym ELISA là một công cụ chuẩn đoán lâm sàng được sử dụng để phát hiện một loạt các bệnh từ di truyền, truyền nhiễm đến dấu hiệu sinh học của ung thư.

Đĩa ELISA được dùng cho các xét nghiệm sinh hóa

+ Đây là phương pháp chuẩn đoán chính xác, nhạy cảm, linh hoạt.

+ Ngày nay, người ta sử dụng kỹ thuật này trong các lĩnh vực nghiên cứu y học, nông nghiệp và đặc biệt quan trọng đối với quy trình kiểm tra an toàn chất lượng các sản phẩm sinh học.

- Đĩa ELISA 96 giếng là loại được dùng phổ biến nhất cho các xét nghiệm.

 2. Đặc điểm của đĩa ELISA 96 giếng

- Là dụng cụ thí nghiệm được sử dụng nhiều trong phòng lab, Đĩa ELISA 96 giếng được sản xuất từ nhựa PS có khả năng tăng tính bám dính của các protein và những phân tử khác với cả nhóm ưa nước và kỵ nước.

- Các phân tử ưa nước chính là kháng nguyên ELISA.

- Thích hợp khi muốn hấp thụ các phân tử kỵ nước.

- Được thiết kế với dạng phiến với bề mặt đồng nhất, đáy phẳng hoặc tròn gồm 96 giếng.

- Trên vành của mỗi giếng có in nhãn đánh ký tự chữ số.

- Thiết kế thuận tiện cho những thao tác bằng tay hoặc tự động.

Đĩa ELISA 96 giếng

3. Các phương pháp sử dụng đĩa ELISA

3.1. ELISA gián tiếp

- Chuyển kháng nguyên lên đĩa ELISA để cố định chúng trên bề mặt này. Nồng độ của các kháng nguyên này sẽ được dùng để thiết lập nên đường chuẩn cho việc tính nồng độ của kháng nguyên trong các mẫu chưa biết.

- Chuyển tiếp các mẫu kháng nguyên chưa biết đã được hòa tan với một loại dung dịch đệm giống với mẫu kháng nguyên chuẩn vào các giếng khác của đĩa ELISA.

- Thêm dung dịch protein không tương tác nhằm ngăn cản sự hấp thụ của các protein khác lên bề mặt đĩa.

- Rửa bề mặt đĩa để chuyển kháng thể đã biết trước vào tất cả các giếng của đĩa. Kháng thể này sẽ kết hợp với kháng nguyên chứ không phải protein.

- Thêm kháng thể thứ cấp để xử lý kháng thể còn dư .

- Rửa đĩa để loại bỏ các kháng nguyên gắn enzyme còn dư.

- Thêm cơ chất.

Chuyển kháng nguyên lên đĩa ELISA

Nhược điểm: Bước cố định kháng nguyên không có tính đặc hiệu nên có thể gắn bất kỳ loại protein nào lên đó khiến những kháng thể có nồng độ thấp phải cạnh tranh với các protein khác trong huyết thanh khi gắn kết với bề mặt đĩa.

3.2. ELISA Sandwich

- Chuẩn bị bề mặt đĩa ELISA có gắn kháng thể

- Khóa tất cả các vị trí gắn kết không đặc hiệu trên bề mặt

- Phủ mẫu chứa kháng kháng nguyên cần cần xác định

- Rửa đĩa, kháng kháng nguyên không được sẽ bị rửa trôi

- Thêm các kháng thể đặc hiệu cho kháng nguyên cần chẩn đoán

-  Thêm kháng thể  thứ cấp đã được gắn với enzym (kháng thể  thứ cấp đặc hiệu cho kháng thể sơ cấp ở

- Rửa đĩa, phần không gắn kết sẽ bị rửa trôi

- Thêm cơ chất. Enzym sẽ biến đổi cơ chất tạo màu, phát quang hay tín hiệu hóa điện

- Đo cường độ ánh sáng, tín hiệu huỳng quang, tín hiệu điện hóa... qua đó xác định sự có mặt và hàm lượng kháng thể.

Enzym biến đổi cơ chất tạo màu

3.3. ELISA cạnh tranh

- "Ủ" kháng thể không được đánh dấu với kháng nguyên.

- Đưa hỗn hợp này vào các giếng của vi phiếm có chứa kháng nguyên.

- Rửa đĩa, kháng thể không được gắn kết sẽ bị rửa trôi. Lượng kháng nguyên càng lớn, lượng kháng thể gắn thành công với kháng nguyên trong đĩa càng thấp do "cạnh tranh".

- Thêm kháng thể thứ cấp.

- Kháng thể thứ cấp gắn với enzym.

- Thêm cơ chất. Lượng enzym còn dư sẽ giải phóng tín hiệu hỳnh quang hay tín hiệu màu.

Trong phương pháp này, hàm lượng kháng nguyên gốc càng cao, tín hiệu sản sinh càng yếu. Một số trường hợp, enzym được gắn với kháng nguyên chứ không phải kháng thể .

3.4. Sử dụng đĩa ELISA với máy đọc đĩa

- Bước 1: Chuẩn bị máy đọc đĩa ELISA

+ Bật công tắc nguồn phía sau máy để khởi động thiết bị. Lúc này máy sẽ bắt đầu chế độ làm việc.

- Bước 2: Chạy chương trình

+ Ấn nút MENU trên màn hình chính

+ Chọn Test operations

+ Chọn Select test by name

+ Chọn thông số cần đo

+ Nhấn nút RUN

+ Nhập số mẫu bệnh phẩm cần chạy trong No.of.samples

+ Nhập tên chủ mẫu bệnh vào mục PID rồi nhấn ESC

+ Ấn RUN để bắt đầu quá trình chạy mẫu, màn hình sẽ hiển thị “Is Plate Loader” YES/NO

+ Đặt đĩa ELISA vào khuây, ấn YES, thiết bị sẽ bắt đầu quá trình đọc mẫu. Kết thúc quá trình đọc, đĩa ELISA sẽ được đẩy ra ngoài. Một thông báo “Is Plate Remove” YES/NO

+ Lấy đĩa ELISA ra rồi nhấn phím YES

+ Kết quả đo sẽ hiển thị trên màn hình và in ra giấy

- Bước 3: Quay về màn hình chính và tắt phím nguồn sau máy

Sử dụng máy đọc đĩa ELISA

Những lưu ý khi sử dụng máy đọc đĩa ELISA

- Không được đặt máy đọc đĩa ELISA ở gần những thiết bị gây ra các nhiễu từ như: máy quay ly tâm, tủ lạnh, tủ sấy.

- Điện áp bên trong máy đọc đĩa có thể gây nguy hiểm đối với cơ thể con người. Do đó, không được mở thiết bị khi chưa ngắt kết nối với nguồn điện.                     

- Đối với các mẫu bệnh phẩm, mẫu máu, thuốc thử và tất cả những vật liệu tiếp xúc với máy đo này cần phải được xử lý giống như vật phẩm có khả năng truyền nhiễm và cần biện pháp phòng ngừa thích hợp.

- Trước khi vận hành máy, cần đọc kĩ hướng dẫn sử dụng để phòng ngừa các lỗi có thể xảy ra với thiết bị do thao tác sai.

- Điện áp bên trong máy đọc đĩa có thể gây nguy hiểm đối với cơ thể con người. Do đó, không được mở thiết bị khi chưa ngắt kết nối với nguồn điện.                     

- Máy đọc được thiết kế sao cho có thể hoạt động liên tục 24 giờ một ngày.

- Bảo quản sản phẩm ở nhiệt độ 15- 32 độ C.

- Trang bị đủ đồ bảo hộ lao động gồm găng tay cao su và áo khoác phòng thí nghiệm.

Trang bị đầy đủ đồ bảo hộ khi làm thí nghiệm

4. Địa chỉ mua đĩa ELISA 96 giếng chất lượng tại Hà Nội

LabVIETCHEM là công ty đi đầu trong lĩnh vực kinh doanh hóa chất, dụng cụ thí nghiệm và các thiết bị khoa học kỹ thuật. Đến nay, công ty đã có 3 trụ sở văn phòng giao dịch chính tại Hà Nội, thành phố Hồ Chí Minh và Cần Thơ.

Hiện nay, đĩa ELISA 96 giếng đang có sẵn tại LabVIETCHEM với số lượng lớn. Các sản phẩm đều được nhập khẩu trực tiếp từ nhà sản xuất, với nguồn gốc xuất xứ rõ ràng, đầy đủ tem nhãn.

Đến với LabVIETCHEM, quý khách sẽ nhận được trải nghiệm mua sắm tốt nhất với chất lượng sản phẩm đảm bảo, nhân viên tư vấn nhiệt tình, chính sách vận chuyển và bảo hành uy tín.

Nếu quý khách đang có nhu cầu tìm mua đĩa ELISA 96 giếng chính hãng, hãy nhanh tay truy cập vào website labvietchem.com.vn hoặc gọi tới số hotline 1900 2639 để được hỗ trợ và báo giá sớm nhất.

Xem thêm:

• Baume kế là gì? Cách sử dụng và chuyển đổi thang đo baume hiệu quả
• LabVIETCHEM - Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh chính hãng hàng đầu Việt Nam